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首页 >> 负离子与癌症
研究为证:负氧离子对肝癌细胞能够发挥非常有益的影响
【发布时间:2017-10-12】 【查看次数:463】

被誉为“长寿素”、“空气维生素”的负氧离子对人体健康十分有益,比如,负氧离具有提高机体免疫力及抗肿瘤的作用。目前关于负氧离子的大多数研究,多集中于流行病学方面的研究,而对于抗肿瘤和及其作用机理的研究并不多。但是通过研究证明,负氧离子对体外肝癌细胞的影响非常有益。

研究所需材料分别为:肝癌细胞株Hepa1-6、碘化丙啶、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒、鼠抗人单克隆抗体P38MAPK和P38MAPK 特异性抑制剂SB203580(使用终浓度为50μmol/L)、森肽基生态级负氧离子生成机、Model IC-2000型空气负离子检测器。

1.准备好材料后进行实验分组,将处于对数生长期的肝癌细胞Hepa1-6随机分成3组, 即空白对照组、空气对照组及负氧离子治疗组。治疗组根据空气负离子作用时间分成1h组、2h组和4h组。对照组孵箱中给予普通空气,负氧离子组将孵箱改造成相对密闭的空间,通过自制的装置输入由森肽基生态级负氧离子生成机产生的负氧离子,同时应用空气离子检测器来检测负氧离子浓度, 在实验前保证负氧离子浓度不高于500 /cm3,电离后维持空气负氧离子浓度在( 2-3)×106 /cm3。

2.用胰蛋白酶消化5-10代肝癌细胞, 制成密度为105/ml左右的细胞悬液。加细胞悬液于盖玻片上, 4h后细胞贴壁, 添加培养基。待细胞生长达50%-60%, 用无血清DMEM 培养液洗2次, 再加条件培养液, 继续培养48h, 收集盖玻片并应用4% 多聚甲醛固定,爬片制作成功后进行染色。

3.收集消化的贴壁细胞, PBS 冲洗后重悬在4℃、70%的乙醇中1-2h, 以1000r/min离心细胞后重悬在含100mg/L RNA 酶和10mg /L碘化丙啶的PBS中,在25℃避光孵育15min。用FACScalibur流式细胞仪进行单色荧光细胞流式计数。结果用Multiplus Software软件分析数据, 每个样本收集10000个细胞, 重复3次。

4.取体外培养的107-108个Hepa1-6细胞,1ml RIPA裂解缓冲液中匀浆提取蛋白, 测定提取的蛋白浓度。每个上样孔加样30μg蛋白, 经电泳、转膜后杂交, 一抗为山羊抗人磷酸化P38MAPK单抗, 二抗为HRP标记兔抗山羊IgG抗体, ECL显色,拍照, 密度扫描测各条带吸光度( IA )。以IA (目的条带/β-actin对照条带),表达各标本上述蛋白含量,重复10次。

  负氧离子


最终结果发现,负氧离子可以明显诱导肝癌Hepa1-6肿瘤细胞的凋亡, S期细胞在各期细胞中所占有的百分率明显下降, 同时在细胞发生凋亡时表达的磷酸化的P38MAPK 明显增加, 其中以负离子作用时间4h组最为明显, 与1h和2h组相比,差异具有统计学意义( P< 0.05)。

其实,关于负氧离子一直癌症发生与发展的研究并非仅有这一例。西安医科大学、陕西省肿瘤医院选择临床晚期恶性肿瘤56例,其中肺癌30例、食管癌8例、恶性淋巴瘤10例,乳腺癌8例,随机分层抽样,实验组(吸入负氧离子加化疗)30例,对照组(单纯化疗)26例。半年后,结果显示:吸入负氧离子的实验组改善总体疗效率为93.33%,对照组为65.38%,表明吸入空气负离子的实验组总体疗效率明显高于对照组。因此专家表示:每天大量空气负氧离子,绝大部分动物可不发生肺内转移瘤。原发瘤亦受到抑制,早期应用远高于晚期应用,但晚期应用也有一定效果。JZX


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